開機(jī)步驟：先開光譜儀電源，再開電腦。然后在桌面找到UV WinLab的圖標(biāo)點(diǎn)進(jìn)去，軟件一打開，儀器就準(zhǔn)備好了，就可以開始干活了。
方法這塊兒，分光光度計(jì)需要用到一些參數(shù)設(shè)定，這些參數(shù)組合起來就叫方法。Lambda系列的UV WinLab自帶四種常用模式：
1）掃描（SCAN），就是用來掃光譜的；
2）時(shí)間驅(qū)動(dòng)（TIME DRIVER），適合觀察某個(gè)波長(zhǎng)下數(shù)值隨時(shí)間的變化，比如測(cè)酶動(dòng)力學(xué)；
3）波長(zhǎng)編程（WP），可以在多個(gè)波長(zhǎng)下測(cè)樣品隨時(shí)間的變化，還能算差值或者比值；
4）濃度（CONC），用來做標(biāo)準(zhǔn)曲線和測(cè)濃度。
操作流程：
進(jìn)方法的話，在方法窗口里選好你要的那個(gè)文件名就行。不同方法設(shè)置方式有點(diǎn)不一樣。
如果是掃描、波長(zhǎng)編程或者時(shí)間驅(qū)動(dòng)，直接看參數(shù)表，按需要設(shè)置就好了，軟件還有提示可以參考。
濃度方法稍微復(fù)雜一點(diǎn)，因?yàn)橐畹膮?shù)多，窗口下面一堆標(biāo)簽，點(diǎn)一個(gè)翻一頁，每頁都要設(shè)置清楚。
工具欄有三個(gè)關(guān)鍵按鈕記得用：
- SETUP：參數(shù)設(shè)好之后一定要點(diǎn)這個(gè)，機(jī)器才會(huì)按照你的設(shè)置調(diào)整狀態(tài)；
- AUTOZERO：點(diǎn)它就能自動(dòng)調(diào)零（掃光譜的時(shí)候是校正基線）；
- START：點(diǎn)了就開始執(zhí)行你設(shè)置的方法。
運(yùn)行方法方面：
掃描、時(shí)間驅(qū)動(dòng)、波長(zhǎng)編程：先把參比放進(jìn)去，點(diǎn)AUTOZERO調(diào)零，完成后再換樣品，點(diǎn)START，機(jī)器就開始跑，屏幕上會(huì)實(shí)時(shí)顯示結(jié)果。
濃度操作稍微麻煩點(diǎn)：
先確認(rèn)方法里的數(shù)據(jù)都對(duì)，尤其是REFS頁第一行要進(jìn)入edit mode編輯模式。然后同樣放參比，點(diǎn)AUTOZERO調(diào)零。接著點(diǎn)SETUP，等圖標(biāo)消失后，再點(diǎn)START，根據(jù)提示依次放標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)去，一步步操作就行。
總之就是一步步來，別跳步，不然容易出錯(cuò)。

1.調(diào)節(jié)好所需測(cè)試的波長(zhǎng)后，接通電源，打開機(jī)蓋，預(yù)熱15-20分鐘。
2.預(yù)熱后，將空白、標(biāo)準(zhǔn)、測(cè)定液分別倒入比色杯2/3處即可，并依次放入比色槽架內(nèi)，打開機(jī)蓋以空白管調(diào)零后再蓋上蓋子調(diào)100，重復(fù)調(diào)零和調(diào)100步驟2-3次，待穩(wěn)定后拉出比色拉桿讀出并記錄標(biāo)準(zhǔn)液A值，再拉一肝讀出并記錄測(cè)定液的A。即可。
注意拉桿時(shí)注意以聽到咔嗒聲為比色杯準(zhǔn)確進(jìn)入光軸路。否側(cè)會(huì)引起測(cè)試不準(zhǔn)確。

分光光度計(jì)的基本工作原理是基于物質(zhì)對(duì)光(對(duì)光的波長(zhǎng))的吸收具有選擇性，不同的物質(zhì)都有各自的吸收光帶，所以，當(dāng)光色散后的光譜通過某一溶液時(shí)，其中某些波長(zhǎng)的光線就會(huì)被溶液吸收。在一定的波長(zhǎng)下，溶液中物質(zhì)的濃度與光能量減弱的程度有一定的比例關(guān)系，即符合比爾定律。

t = i/io lg(io/i)=εcb

式中，t為透過率，io為入射光強(qiáng)度，i為透射光強(qiáng)度，a為消光值(吸光度)，ε為吸收系數(shù)，b為溶液的光徑長(zhǎng)度，c為溶液的濃度。從以上公式可以看出，當(dāng)入射光、吸收系數(shù)和溶液厚度一定時(shí)，透光率是根據(jù)溶液的濃度而變化的。

721型分光光度計(jì)的構(gòu)造

721型分光光度計(jì)允許的測(cè)定波長(zhǎng)范圍在360～800nm，其構(gòu)造比較簡(jiǎn)單，測(cè)定的靈敏度和精密度較高。因此，應(yīng)用比較廣泛。

721型分光光度計(jì)的儀器構(gòu)造見圖5-5。從光源燈發(fā)出的連續(xù)輻射光線，射到聚光透鏡上，會(huì)聚后，再經(jīng)過平面鏡轉(zhuǎn)角90°，反射至入射狹縫。由此入射到單色器內(nèi)，狹縫正好位于球面準(zhǔn)直物鏡的焦面上，當(dāng)入射光線經(jīng)過準(zhǔn)直物鏡反射后，就以一束平行光射向棱鏡。光線進(jìn)入棱鏡后，進(jìn)行色散。色散后回來的光線，再經(jīng)過準(zhǔn)直鏡反射，就會(huì)聚在出光狹縫上，再通過聚光鏡后進(jìn)入比色皿，光線一部分被吸收，透過的光進(jìn)入光電管，產(chǎn)生相應(yīng)的光電流，經(jīng)放大后在微安表上讀出。

721型分光光度計(jì)的使用方法

①首先接通電源，打開電源開關(guān)1，指示燈亮，打開比色皿暗箱蓋8，預(yù)熱20分鐘。

②波長(zhǎng)選擇旋鈕6，選擇所需的單色光波長(zhǎng)，用靈敏度旋鈕2選擇所需的靈敏檔。

③放入比色皿，旋轉(zhuǎn)零位旋鈕5調(diào)零，將比色皿暗箱蓋合上，推進(jìn)比色皿拉桿3，使參比比色皿處于空白校正位置，使光電管見光，旋轉(zhuǎn)透光率調(diào)節(jié)旋鈕4，使微安表9指針準(zhǔn)確處于100%。按上述方法連續(xù)幾次調(diào)整零位和100%位，即可進(jìn)行測(cè)定工作(儀器面板見 圖5-6)。

721型分光光度計(jì)使用和維護(hù)中應(yīng)注意事項(xiàng)：

①連續(xù)使用儀器的時(shí)間不應(yīng)超過2小時(shí)，最好是間歇0.5小時(shí)后，再繼續(xù)使用。

②比色皿每次使用完畢后，要用去離子水洗凈并倒置晾干后，存放在比色皿盒內(nèi)。在日常使用中應(yīng)注意保護(hù)比色皿的透光面，使其不受損壞或產(chǎn)生劃痕，以免影響透光率。

③儀器不能受潮。在日常使用中，應(yīng)經(jīng)常注意單色器上的防潮硅膠(在儀器的底部)是否變色，如硅膠的顏色已變紅，應(yīng)立即取出烘干或更換。

④在托運(yùn)或移動(dòng)儀器時(shí)，應(yīng)注意小心輕放

開機(jī)但不測(cè)樣品時(shí)，把樣品室的蓋打開，保護(hù)光電管

　　處理化學(xué)分光光度計(jì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的步驟如下：
　　1. **數(shù)據(jù)輸入：** 將實(shí)驗(yàn)測(cè)得的吸光度數(shù)據(jù)輸入Excel的一列中，通常第一列為濃度(或波長(zhǎng))，第二列為吸光度。
　　2. **繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：** 如果你的實(shí)驗(yàn)是為了構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以將濃度與吸光度的數(shù)據(jù)繪制成散點(diǎn)圖。選擇數(shù)據(jù)，點(diǎn)擊"插入" -> "散點(diǎn)圖"，然后選擇"散點(diǎn)圖(只有標(biāo)記)"。
　　3. **趨勢(shì)線擬合：** 在標(biāo)準(zhǔn)曲線的散點(diǎn)圖上，可以添加趨勢(shì)線，選擇適當(dāng)?shù)内厔?shì)線類型(如線性、二次、對(duì)數(shù)等)，以擬合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
　　4. **計(jì)算未知樣品濃度：** 將未知樣品的吸光度值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的方程中，計(jì)算出未知樣品的濃度。
　　5. **數(shù)據(jù)分析：** 利用Excel的函數(shù)和圖表功能，可以進(jìn)行進(jìn)一步的數(shù)據(jù)分析，比如計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)偏差、相關(guān)系數(shù)等。
　　6. **圖表展示：** 利用Excel繪制圖表，比如吸光度隨濃度變化的曲線圖，用以展示實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
　　7. **數(shù)據(jù)導(dǎo)出：** 如果需要將處理后的數(shù)據(jù)用于其他用途，可以將數(shù)據(jù)導(dǎo)出為CSV文件或其他格式，以便在其他軟件中使用。
　　以上是一般處理化學(xué)分光光度計(jì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的基本步驟，具體操作可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要和數(shù)據(jù)的特點(diǎn)進(jìn)行調(diào)整和擴(kuò)展。
　　使用excel處理化學(xué)分光光度計(jì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的方法:
　　第一步，打開excel。
　　第二部，在excel中輸入標(biāo)準(zhǔn)曲線的數(shù)據(jù)。
　　第三步，點(diǎn)擊插入，選擇圖表中的散點(diǎn)圖。
　　第四步，在出現(xiàn)的圖表框中右擊出現(xiàn)菜單，選擇“選擇數(shù)據(jù)”。
　　第五步，在出現(xiàn)的對(duì)話框后，移動(dòng)鼠標(biāo)選擇我們要的這兩行數(shù)，然后確定。
　　第六步，然后在圖表上移到有點(diǎn)的地方右鍵，在出來的菜單中選擇添加趨勢(shì)線。
　　第七步，添加好趨勢(shì)線后，按我們的需求做下一步，比如顯示公式或線性

721型分光光度計(jì)其波長(zhǎng)范圍360～800nm，色散元件為三角棱形.

操作方法：

（1）儀器尚未接通電源時(shí)，電表的指針必須位于“0”刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲進(jìn)行調(diào)節(jié)。

（2）儀器的電源開關(guān)接通（接220v交流電），打開比色槽暗箱蓋，使電表指針處于“0”位，預(yù)熱20分鐘后，再選擇需用的單色光波長(zhǎng)和相應(yīng)的放大靈敏度檔，用調(diào)零電位器校正電表“0”位。

（3）將儀器的比色槽暗箱合上，比色槽座處于蒸餾水校正位子，使光電管見光，旋轉(zhuǎn)光量調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)光電管輸出的光電訊號(hào)使電表指針正確處于100%。

（4）按上述方式連續(xù)幾次調(diào)正“0”位和電表指針100%，儀器即可進(jìn)行測(cè)定工作。

（5）放大器靈敏度檔的選擇是根據(jù)不同的單色光波長(zhǎng)，光能量不一致時(shí)分別選用，其各檔的靈敏度范圍是：

第一檔×1倍 第二檔×10倍 第三檔×20倍

選用的原則是能使空白檔良好的用光量調(diào)節(jié)器調(diào)整于100%處。

（6）空白檔可以采用空氣空白，蒸餾水空白或其他有色溶液中性吸光玻璃作陪襯。空白調(diào)節(jié)于100%處，能提高吸光度數(shù)以適應(yīng)溶液的高含量測(cè)定。

（7）根據(jù)溶液中的被測(cè)物含量的不同可以酌情選用不同規(guī)格光程長(zhǎng)度的比色槽，目的是使電表讀數(shù)處于0.8消光之內(nèi)。

斤斤計(jì)較經(jīng)濟(jì)